綠弧菌已成對蝦養殖攔路虎！2022對蝦養殖如何高效防控？ |
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2022-03-09 10:13:00 水產養殖網 出處：水產養殖網
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| 對蝦養殖中后期水溫升高、投喂量很大，底質水質容易變差，弧菌極易在這種環境里大量繁殖，2021年弧菌病已導致沿海很多蝦農損失慘重，部分產區蝦農多次排苗、欲哭無淚。2022年，蝦農如何防控弧菌？
作者：南京農業大學病理學博士 彭麟
金南農研究院 朱忠超
一、固體過氧化氫的細菌殺滅試驗
1、菌懸液的制備
取各試驗菌種的斜面第3代培養物，用無菌生理鹽水洗下菌苔，移至另一無菌試管，適當稀釋使菌含量為 1 × 107 ～ 5 × 107 CFU·mL-1，制成菌懸液備用。中和劑選擇試驗: 中和劑組方: 10 g·L-1硫代硫酸鈉( A 組) ，10 g·L-1硫代硫酸鈉 + 10 g·L -1吐溫-80 ( B 組) ，10 g·L-1 硫代硫酸鈉 + 10 g·L-1 吐溫-80 + 10 g·L-1卵磷脂( C 組) ，20 g·L-1 硫代硫酸鈉( D 組)，均以 PBS 緩沖液配制。以大腸桿菌為試驗菌株，以 10.8 g·L-1過氧化氫消毒溶液為試藥，設計 6 組：
1) 消毒劑+菌懸液;
2) 消毒劑+菌懸液)+中和劑;
3) 中和劑+菌懸液;
4) 消毒劑+中和劑)+菌懸液;
5) 菌懸液;
6) 培養基。
1.1試驗結果判定標準：第 6 組無菌生長，第 4 組無菌生長或僅有少量菌落生長; 第 1 組有菌落生長，較 第 4 組為多，但較第 2、3、5 組為少; 第 2、3、5 組組間誤差率不超過 15% 。如試驗結果符合以上標準則表明 所選中和劑及其濃度適宜。試驗重復 3 次。
1.2定量殺菌試驗：設計 10.8 g·L-1、5.4 g·L-1和2.7 g·L-1 3 種質量濃度的 過氧化氫消毒藥液。固體過氧化氫消毒液在使用時用無菌水配制。以無菌生理鹽水作為陽性對照。取0.5 mL 菌懸液置于無菌試管內，加入 4.5 mL 試驗濃度消毒液，立即混勻。分別作用至預設時間( 30 min、60 min、90 min 和 120 min) 后，各取0.5 mL 混合液加入到含4.5mL 中和劑的試管內，作用 30 min 后取 0.5mL 該液做活菌計數，計算殺菌率。試驗重復 3 次。
結果處理:按如下公式計算各試驗組的平均殺菌率( P)
P = ∑( Noi － Nti )/ ∑Noi × 100%
式中：Noi為第 i 次試驗消毒前或對照組活菌數; Nti為第 i 次試驗消毒 t 時后或試驗組活菌數。消毒效果評價標準: 對細菌和真菌的殺滅率不低于99.9% ，可判為消毒合格。
數據分析：采用 SPSS 17.0統計軟件，對殺菌結果進行方差分析和 Duncan's 多重比較。
2、結果與分析
2.1固體過氧化氫殺菌效果觀察
2.1.1中和劑選擇：由表 1 可知，中和劑A組第 1 組無菌落生長，且第 2、3、5組間的菌落數誤差率為 25.52% ，根據要求，第2、3、5組間的菌落數誤差率須小于15% ，所以 A組不符合要求; B組第1組有少量菌落生長，第 4 組無菌落生長，但第 2、3、5 組間的菌落數誤差率達到 22.75% ，不符合要求; C 組第1組和第4組菌落數符合要求，但第2、3、5組間的菌落數誤差率為18.75% ,也不符合要求。D組第1、4 組菌落數符合要求，且第 2、3、5 組間的菌落數誤差率( 3.78% ) 也符合規范要求。上述結果表明，含20 g·L-1硫代硫酸鈉的 PBS 緩沖液作為中和劑，可有效中和10.8 g·L-1 過氧化氫消毒液的殘留作用。
注: 1) A 組: 10 g·L-1硫代硫酸鈉； B 組: 10 g·L-1硫代硫酸鈉+10 g·L-1吐溫-80；C 組: 10 g·L-1硫代硫酸鈉+10 g·L-1吐溫-80+10 g·L-1卵磷脂; D 組: 20 g·L-1硫代硫酸鈉
2.1.2試驗分組: 1.消毒劑+菌懸液; 2.(消毒劑 +菌懸液)+中和劑; 3.中和劑+菌懸液; 4.(消毒劑 +中和劑) +菌懸液; 5.菌懸液; 6.培養基
固體過氧化氫的殺菌效果：由表2可知，10.8g·L-1過氧化氫消毒液作用30 min，殺滅大腸桿菌效果可達到 99.99% ，消毒合格; 3 種濃度分別作用 60 min，殺菌效果均可達到 99.9% 以上，但10.8 g·L-1與另兩種濃度相比，差異顯著( P＜ 0. 05) 5.4g·L-1濃度組與2.7 g·L-1組相比，差異不顯著( P＞0.05) �？筛鶕� 需求選擇不同的作用濃度和作用時間。10.8g·L-1 過氧化氫 消毒液與金黃色葡萄球菌作用 30 min 的殺菌率達到了99.92% ,5.4g·L-1濃度組相比差異不顯著( P＞0.05) 10.8g·L-1及5.4 g·L-1 濃度組消毒液作用 90 min 時的效果與作用 60min 和 30 min 相比均存在顯著性差異( P＜0.05) 。2.7g·L-1消毒液不同作用時間殺菌率差異顯著( P＜0.05)。因此可根據不同需求選擇不同作用濃度和時間。 3種濃度分別與副溶血弧菌作用 120 min，殺菌率均可達到 100% ，差異不顯著( P＞0.05) 。
注: 同菌種同列不同小寫字母表示差異顯著( P＜0.05) 同行不同大寫字母表示差異顯著( P＜0.05) 。
通過固體過氧化氫對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和副溶血弧菌的殺菌試驗，先進一步驗證固體過氧化氫殺菌的有效性，同時為南美白對蝦養殖致病菌的防控提供更堅實的數據，結合南美白對蝦養殖一線分析，才能更好的對致病菌進行防控。
二、南美白對蝦養殖弧菌感染的來源
1、水體本身存在
一般來說， 弧菌是天然水域自然存在的，屬于厭氧菌。如果水體溶氧不足，“氧債”增加，就會給弧菌滋生提供了有利條件。
2、苗種自帶
如果在親蝦時期，感染上了弧菌，弧菌可通過垂直方式感染至無節幼體中。苗體中自帶的弧菌，具有破壞性大、傳染性強、危害深遠的特點。
三、弧菌的防控周期
1、前期（放苗后--30天）。此階段苗體較小，以粉料及小粒徑飼料為主，而對蝦攝食量有限，產生的殘餌多，導致水體中有機物會快速增加，弧菌會快速繁殖，尤其是體內弧菌的繁殖，破壞力更大，危害更嚴重。此階段弧菌防控應為3-5天一次。
蝦苗期弧菌較多，蝦苗可以安全消毒殺菌嗎？首先明確告訴大家， 苗期是可以消毒的，但是要選正確、安全、無刺激的消毒產品！
如何將產品做到安全無刺激、無殘留？金南農研究院歷經10年研發的專利性產品--固體過氧化氫粉，很好的解決了這些難點和痛點。
2、中期（31--60天）。此階段對蝦個頭變大，飼料投喂增加，飼料粒徑在1.0左右，對蝦處于快速生長期，對水體溶氧需求增大。如果溶氧不足，弧菌就會大量繁殖。此階段弧菌防控應為5-7天一次。
3、后期（61--90天）。此階段飼料投喂量大，易出現缺氧現象，導致弧菌爆發。此階段弧菌防控為7-10天一次，推薦使用量為：過氧化氫粉250克/棚+過氧化氫顆粒500克/棚。
四、弧菌為什么爆發快
通過多年的跟蹤分析，對于弧菌快速爆發原因，總結如下：
1、苗種自帶的弧菌，危害很大，導致苗種死亡率更高；
2、底溶氧不足，弧菌繁殖加快；
3、水體有機物過多，水體耗氧量劇增，導致弧菌快速繁殖；
4、消毒類產品的不合理使用，導致水體微生態失衡，弧菌增加；
5、極端氣候的出現，會導致弧菌防控難度增加。
水產養殖就是養水, 要進行南美白對蝦的高效養殖和產出 , 其硬性條件是有利于南美白對蝦健康生長的水質, 水體中的細菌微生物作為南美白對蝦養殖中的動態因素，然而在追求高產為中心的養殖模式中，由于水體環境的惡化速度加快，致病菌快速大量的繁殖，導致南美白對蝦很容易出現細菌感染，引發各類肝胰腺和腸道疾病，嚴重制約和影響了南美白對蝦養殖的穩產和高產 。
小棚對蝦養殖、工廠化對蝦養殖以及高位池對蝦養殖作為不同高密度養殖模式，對養殖環境和相關使用產品都有較高要求，尤其是在選用消毒類產品的時候，非常謹慎。而固體過氧化氫作為一款綠色環保第六代消毒劑，真正做到“無刺激、無殘留、無余氯”，可全天候使用，不受條件限制，結束了常規消毒劑各種使用限制，像陰天、下雨、蛻殼期、氣溫變化大等制約因素，固體過氧化氫做到了百用無禁忌，防控弧菌、氣單胞菌及病毒更超前。 |
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